Kromatografia e shtresës së hollë është një metodë e analizës kimike e bazuar në përdorimin e një shtrese sorbente me një trashësi prej 0,1-0,5 mm si fazë stacionare. Metoda TLC mund të përdoret në fusha të ndryshme dhe lejon përcaktimin e një larmie të gjerë të përbërjeve kimike.
Parimi i metodës
Metoda e kromatografisë me shtresë të hollë lindi nga kromatografia në letër dhe eksperimentet e para u kryen në vitet 80 të shekullit të 19-të. Përdorimi aktiv i kësaj analize filloi vetëm pas vitit 1938.
Teknika e TLC përfshin një fazë të lëvizshme (eluent), një fazë stacionare (sorbent) dhe një analizë. Faza e palëvizshme zbatohet dhe fiksohet në një pllakë të veçantë. Pllaka mund të jetë prej qelqi, alumini ose plastike - këto janë nënshtresa të ripërdorshme që duhet të lahen, thahen dhe përgatiten plotësisht për aplikimin e sorbentit pas çdo përdorimi. Alsoshtë gjithashtu e mundur të përdoren pllaka letre që hidhen pas përdorimit.
Xhel silicë përdoret më shpesh si faza e palëvizshme, por është e mundur të përdoren sorbente të tjerë, për shembull, oksid alumini. Kur përdorni këtë apo atë sorbent, teknologjia duhet të ndiqet në mënyrë rigoroze në mënyrë që rezultati të jetë i saktë, për shembull, sepse xhel silicë mund të japë një rezultat të pasaktë nëse ajri në laborator është shumë i lagësht.
Tretësit përdoren si fazë e lëvizshme, për shembull, ujë, acid acetik, etanol, aceton, benzinë. Zgjedhja e një tretësi duhet të merret me përgjegjësi, sepse rezultati i kromatografisë varet drejtpërdrejt nga cilësitë e tij (viskoziteti, dendësia, pastërtia). Për secilën mostër të analizuar zgjidhet një tretës individual.
Analiza
Mostra duhet të hollohet në një tretës. Nëse shpërbërja e plotë nuk ndodh dhe mbeten shumë papastërti, atëherë mostra mund të pastrohet me ekstraktim.
Zbatimi i mostrës në pllakë mund të bëhet automatikisht ose manualisht. Aplikimi automatik përdor një metodë mikrospray, ku secili mostër spërkatet në zonën e duhur të substratit. Për aplikim manual, përdoret një mikropipetë. Shenjat e lapsit vendosen në pllakë për secilën mostër. Çdo mostër zbatohet me një kapilar në pllakë në një vijë në një distancë të mjaftueshme nga shenjat në mënyrë që të mos reagojë me karbonin nga plumbi.
Pllaka vendoset në një enë, në pjesën e poshtme të së cilës derdhet eluent. Mbështetja vendoset me një buzë në enë deri në vijën e shënuar. Ena është e mbyllur fort për të shmangur avullimin e fazës së lëvizshme. Nën veprimin e forcave kapilare, eluentja fillon të ngrihet lart në shtresën sorbente. Kur eluenti arrin një nivel të caktuar, pllaka hiqet nga ena dhe thahet.
Nëse substanca e dëshiruar nuk ka ngjyrë, atëherë ajo nuk do të jetë e dukshme në substrat. Prandaj, kryhet vizualizimi - përpunimi i pllakës me avull jodi ose ngjyra të tjera.
Pas një përpunimi të tillë, rezultati vlerësohet. Zonat me ngjyra me intensitet të ndryshëm shfaqen në sorbent. Për të përcaktuar një substancë (ose një grup substancash), zonat me ngjyra, madhësia, intensiteti dhe lëvizshmëria e tyre krahasohen me një mostër referimi.
Metoda TLC përdoret gjerësisht sepse është e shpejtë, e lirë, e saktë, intuitive, nuk kërkon pajisje komplekse dhe është e lehtë për tu interpretuar.
